蛋白層析柱的特性及原理介紹

　　蛋白層析柱在蛋白，多肽，抗體等等行業中占據了重要的地位，廣泛應用于制備分離的各類化合物。蛋白層析柱在原有蛋白層析分離柱的特性上還兼具了以下特性：

　　1、耐高壓：允許實驗過程中使用較高的流速，加快實驗進程以及適合硬基質的色譜填料。

　　2、防爆性：可以選擇外貼防爆膜，防止玻璃管子爆裂，對人員造成傷害。

　　3、可重復：一根柱管可多次使用，大大節約了您的成本。

　　4、可見性：分離帶顏色復雜天然產物，您可以直觀的看到分離色帶。

　　5、篩板：可以提供各種粒徑的篩板，優良的分配效果，達到更好的分離度。

　　6、優異的流體結構。

　　蛋白質層析通過利用蛋白質在流動相和固定相中分配不同的原理進行分離和純化。 蛋白質層析技術是生物化學研究中的一個重要工具，它根據蛋白質的物理和化學特性實現高效純化。 

　　定義：蛋白質層析是一種利用蛋白質在流動相和固定相之間不同分配原理進行分離純化的技術。

　　原理：不同蛋白質具有不同的物理和化學特性，如分子大小、形狀、電荷和疏水性等。當蛋白質溶液流經固定相時，各組分以不同強度的作用力結合在固定相上，從而實現分離。 

　　凝膠過濾層析：利用蛋白質分子的大小差異進行分離。大分子無法進入凝膠顆粒的孔隙，優先洗脫;小分子則進入孔隙，延后洗脫。

　　離子交換層析：基于蛋白質表面電荷的差異進行分離。通過改變pH或增加離子強度，使帶電蛋白質與固定相的離子交換樹脂可逆結合并逐一洗脫。

　　親和層析：利用生物大分子的特異性親和力進行分離。例如，通過基因工程引入特定標簽，使目標蛋白與配基特異性結合，從而實現高效純化。

　　疏水作用層析：通過蛋白質疏水性差異進行分離。在高鹽條件下蛋白質疏水性增強，與固定相疏水配基結合，然后逐步降低鹽濃度將蛋白質洗脫。

　　蛋白層析柱的工作原理

　　1. 預處理：在吸附樹脂的生產過程中，一般采用的是工業級原料，產品沒有經過進一步純化處理，樹脂內部殘留少量單體，所以在使用之前，需用水溶性溶劑對其浸泡處理，然后用去離子水通過樹脂層，置換出水溶性溶劑離子方可投入使用。

　　2. 逆流洗柱：用水洗出去水離子及破碎填料，樹脂裝入后，用蒸餾水反洗樹脂層，直至出水清晰、無氣味、無細碎樹脂為止。再依次用酸堿等浸泡、沖洗樹脂層，至出水呈中性為止。

　　3. 水洗：水洗的主要目的是除去層析柱上所附著的渣滓。

　　4. 吸附：吸附操作自上而下(或自下而上)通液，可采用不同流速，以選取*條件。流出液每隔一段時間取樣檢測，達泄漏點停止吸附，或多柱串聯達飽和后解吸。吸附主要是吸取料液中的渣滓或要回收物，該過程應控制料液的速度及吸附量，大孔樹脂應*浸泡在料液里，以提高吸附效果和運行穩定性。

　　5. 解吸、再生：解吸操作自上而下(或自下而上)通解吸劑，單柱吸附時，解吸與吸附操作對流為佳。解吸劑沸點要低以便回收處理。